УЛЬТРАЗВУКОВОЕ ВОЗБУЖДЕНИЕ МИКРОИНСТРУМЕНТОВ ПРИ ИНТРАЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ИНЬЕКЦИИ СПЕРМАТОЗОИДОВ

Ю.Сун Ен, В.А. Викторов, А.С. Кауфман

Токийский центр ЭКО,
124-0025, Сегатао-ки, 4-9-24/502, Токио, Япония
ЗАО ВНИИМП-ВИТА,
125422, Москва, Тимирязевская,1
тел. 211-48-38

Развитие техники микроманипуляций в рамках программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) открыло новые возможности в лечении самых тяжелых форм мужского бесплодия: при наличии единичных сперматозоидов в эякуляте и даже при полном их отсутствии. В последнем случае сперматозоиды или сперматиды извлекают из биоптата, получаемого путем биопсии яичек (TESA) или их придатков (MESA). Метод интрацитоплазматической инъекции сперматозоида в яйцеклетки (ICSI, ИКСИ) позволяет иметь генетически родного ребенка практически каждому мужчине, что привело к резкому снижению потребности в донорской сперме со всеми вытекающими из ее использования проблемами. Для выполнения ИКСИ необходимо как базовое оборудование лаборатории ЭКО (ламинар, инкубаторы СО2, дисекторный, инвертированный и фазовоконтрастный микроскопы, центрифуга) так и специализированные микроманипуляторы для работы с клетками и микрокузница для изготовления микроинструментов непосредственно в лаборатории. После получения под ультразвуковым контролем яйцеклеток путем трансвагинальной пункции яичников эякулят или биоптат яичек/придатков партнера подвергают специальной обработке с целью выделения сперматозоидов или сперматид. Сперматозоид обездвиживают механическим путем (“ломают” хвост), забирают его в микроиглу, затем вскрывают блестящую оболочку яйцеклетки, фиксированной с помощью “присоски”, прокалывают цитоплазматическую мембрану и “впрыскивают” сперматозоид в цитоплазму. Как правило, инъекцию производят во все полученные яйцеклетки, исходя из количества мужских гамет. Условием успешной фертилизации яйцеклетки является неподвижность сперматозоида во избежание повреждения интимных структур яйцеклетки и обязательность прокалывания цитоплазматической мембраны. В силу эластичности последней она может под давлением микроинъекционной иглы отодвинуться вглубь яйцеклетки, и сперматозоид окажется не в цитоплазме, а в перивителлиновом пространстве. Именно этой технической погрешностью объясняется неуспех первых попыток ИКСИ, после чего идея такого способа лечения бесплодия была оставлена на 10 лет. В течение последних 4-5 лет благодаря совершенствованию микроманипуляционной техники и инструментария частота наступления беременности после применения ИКСИ достигает 45-70%, превышая таковую после ЭКО. Существенное снижение уровня повреждения цитоплазмы яйцеклетки может быть достигнуто при использовании предлагаемого ультразвукового возбуждения инструментов. При ультразвуковом возбуждении микроинекционной иглы локальная диссипация энергии позволяет во много раз снизить трение и деформации клеточных структур при движении иглы, дает возможность пройти цитоплазматическую мембрану практически без ее инвагинации и без стандартной проверки прокола путем аспирации цитоплазмы. Кроме того, можно пройти и блестящую оболочку, и цитоплазматическую мембрану за один прием. Параметры ультразвуковых колебаний и профиль режущей кромки иглы выбраны таким образом, чтобы обеспечивалось практически полное поглощение избыточной энергии в районе внедрения иглы. После прохода режущей кромкой иглы блестящей оболочки энергию ультразвуковых колебаний уменьшают, что позволяет, гарантировано избежать травматизации органелл.

Содержание конференции | Секция5