ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ γ –ЛУЧЕЙ И ЭКСТРАКТА ВИНОГРАДНЫХ КОСТОЧЕК НА ЛИМФОЦИТЫ ЧЕЛОВЕКА
Ц.А.Чихладзе, Н.А.Джавахишвили
Институт экспериментальной морфологии АНГР, Тбилиси
Увеличение числа людей, подвергаемых действию радиации в процессе профессиональной деятельности или проживающих в загрязненных районах, настоятельно требует интенсивного исследования новых эффективно действующих радиопротекторов.
Установлено, что радиозащитная активность радиопротекторов связана с их влиянием на окислительные процессы, протекающие в клетке во время облучения.
В литературе сообщается об изучении действия природных и синтезированных препаратов с радиопротекторными свойствами на различные клетки высших эукариот и организмы (1.2.3). Многие природные антиоксиданты такие, как: супероксидисмутаза, каталаза, аскорбиновая кислота, мочевина, каротиды, глутатион, различные витамины и т.д., обладают защитными свойствами против повреждающего действия свободных радикалов в клетке.
Целью настоящих исследований было цитогенетическое изучение радиопротекторной активности антиоксиданта ЭВК - экстракта виноградных косточек (4).
Исследования проведены на культуре лимфоцитов периферической крови практически здоровых доноров в возрасте от 25 до 45 лет. Культивирование лимфоцитов осуществлялось по стандартной методике. Регистрация хромосомных аберраций осуществлялась методами хромосомного и микроядерного тестирования.
Эксперименты проводились по следующей схеме: в ФГА стимулированную культуру лимфоцитов через 24 часа после начала культивирования вводили ЭВК, после чего культуры облучались γ -лучами от источника 60/Со.
Результаты исследований представлены в таблицах 1,2. Видно, что несмотря на сильную вариабильность результатов изучения комбинированного воздействия ЭВК и ионизирующей радиации на культивированные лимфоциты периферической крови человека, можно константировать наличие радиопротекторных своиств ЭВК.
По данным, представленным в таблице 1. (микроядерный тест), индивидуальная вариабильность радиопротекторной активности ЭВК для дозы в 2 грея колеблется от 41,2 до 49,5%. Результаты хромосомного тестирования приведены в таблице 2. Видно, что в культурах лимфоцитов, комбинированно обработанных ЭВК и γ -излучением, частота аберраций хромосомного типа ниже, чем в таких же культурах, только облученных. Известно, что через 24 часа после ФГА стимулации культивируемые лимфоциты периферической крови здоровых доноров находится на границе фаз репликативного цикла G1 - S, т.е.большинство из ных либо заканчивает фазу G1, либо перешла в S-фазу. Следовательно, на основании хромосомного тестирования можно судить о том в какой период репликативного цикла радиопротектор реагирует с клеткой. В данном случае (таблица 2.) уменьшение числа аберраций хромосомного типа, индуцированных γ -излучением, в культуре лимфоцитов, обработанных ЭВК, свидетельствуют о том, что ЭВК действует как протектор во время G1 фазы митотического цикла.
Исходя из полученных результатов о наличии радиозащитных свойств у ЭВК по отнашению к γ -излучению в лимфоцитах периферической крови здоровых доноров, можно предположить, что ЭВК способен интенсифицировать репарационные системы и востанавливать однонитевые разрывы молекул ДНК.
Последнее имеет характер, схожий с активностью антиоксидантов, и, по всей видимости, связано с активацией репарационных ферментов, работающих в G1-фазе митотического цикла.
Таблица N1 Микроядерный тест в оценке радиозащитной активности ЭВК
N донора |
Вариант эксперим. |
кол-во клеток |
кол-во микроядер |
Радизащита (%) |
1 |
γ ЭВК+ γ |
1000 1000 |
140 80 |
42,8 |
2 |
γ ЭВК+ γ |
1000 1000 |
170 100 |
41,2 |
3 |
γ ЭВК+ γ |
1000 1000 |
188 104 |
49,5 |
4 |
γ ЭВК+ γ |
1000 1000 |
190 100 |
47,4 |
Таблица N2 Хромосомный анализ в оценке радиопротекторной активности ЭВК
вариант эксперимента |
хромосомн. аберрации |
хроматид. аберрации |
Радиозащита (%) |
γ ЭВК+ γ |
40 20 |
20 18 |
50 |
Литература
- Бурлакова Е.Б., Гаинцева В.Д. -Докл.АН СССР. т.155.N6.ст.1398-1400. 1964.
- Бурлакова Е.Б.,Дзюба Н.М.- Синтетические Ингибиторы и природные антиоксиданты. Биофизика. вып.5.N10.ст.766-770.1965.
- Шербаков В.К.,Иофа Н.Н.Митотическая активность клеток и рост корешков Allium fistulosum при действии гидрозидов Цитология т.7.N1.ст.100-103.1965.
- http://www.worldimage.com/products/info/grapeseedextract.html
Содержание конференции | Секция5
|