ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ γ –ЛУЧЕЙ И ЭКСТРАКТА ВИНОГРАДНЫХ КОСТОЧЕК НА ЛИМФОЦИТЫ ЧЕЛОВЕКА

Ц.А.Чихладзе, Н.А.Джавахишвили

Институт экспериментальной морфологии АНГР,
Тбилиси

Увеличение числа людей, подвергаемых действию радиации в процессе профессиональной деятельности или проживающих в загрязненных районах, настоятельно требует интенсивного исследования новых эффективно действующих радиопротекторов.

Установлено, что радиозащитная активность радиопротекторов связана с их влиянием на окислительные процессы, протекающие в клетке во время облучения.

В литературе сообщается об изучении действия природных и синтезированных препаратов с радиопротекторными свойствами на различные клетки высших эукариот и организмы (1.2.3). Многие природные антиоксиданты такие, как: супероксидисмутаза, каталаза, аскорбиновая кислота, мочевина, каротиды, глутатион, различные витамины и т.д., обладают защитными свойствами против повреждающего действия свободных радикалов в клетке.

Целью настоящих исследований было цитогенетическое изучение радиопротекторной активности антиоксиданта ЭВК - экстракта виноградных косточек (4).

Исследования проведены на культуре лимфоцитов периферической крови практически здоровых доноров в возрасте от 25 до 45 лет. Культивирование лимфоцитов осуществлялось по стандартной методике. Регистрация хромосомных аберраций осуществлялась методами хромосомного и микроядерного тестирования.

Эксперименты проводились по следующей схеме: в ФГА стимулированную культуру лимфоцитов через 24 часа после начала культивирования вводили ЭВК, после чего культуры облучались γ -лучами от источника 60/Со.

Результаты исследований представлены в таблицах 1,2. Видно, что несмотря на сильную вариабильность результатов изучения комбинированного воздействия ЭВК и ионизирующей радиации на культивированные лимфоциты периферической крови человека, можно константировать наличие радиопротекторных своиств ЭВК.

По данным, представленным в таблице 1. (микроядерный тест), индивидуальная вариабильность радиопротекторной активности ЭВК для дозы в 2 грея колеблется от 41,2 до 49,5%. Результаты хромосомного тестирования приведены в таблице 2. Видно, что в культурах лимфоцитов, комбинированно обработанных ЭВК и γ -излучением, частота аберраций хромосомного типа ниже, чем в таких же культурах, только облученных. Известно, что через 24 часа после ФГА стимулации культивируемые лимфоциты периферической крови здоровых доноров находится на границе фаз репликативного цикла G1 - S, т.е.большинство из ных либо заканчивает фазу G1, либо перешла в S-фазу. Следовательно, на основании хромосомного тестирования можно судить о том в какой период репликативного цикла радиопротектор реагирует с клеткой. В данном случае (таблица 2.) уменьшение числа аберраций хромосомного типа, индуцированных γ -излучением, в культуре лимфоцитов, обработанных ЭВК, свидетельствуют о том, что ЭВК действует как протектор во время G1 фазы митотического цикла.

Исходя из полученных результатов о наличии радиозащитных свойств у ЭВК по отнашению к γ -излучению в лимфоцитах периферической крови здоровых доноров, можно предположить, что ЭВК способен интенсифицировать репарационные системы и востанавливать однонитевые разрывы молекул ДНК.

Последнее имеет характер, схожий с активностью антиоксидантов, и, по всей видимости, связано с активацией репарационных ферментов, работающих в G1-фазе митотического цикла.


Таблица N1 Микроядерный тест в оценке радиозащитной активности ЭВК

N донора Вариант эксперим. кол-во клеток кол-во микроядер Радизащита (%)
1 γ
ЭВК+ γ
1000
1000
140
80
42,8
2 γ
ЭВК+ γ
1000
1000
170
100
41,2
3 γ
ЭВК+ γ
1000
1000
188
104
49,5
4 γ
ЭВК+ γ
1000
1000
190
100
47,4


Таблица N2 Хромосомный анализ в оценке радиопротекторной активности ЭВК

вариант эксперимента хромосомн. аберрации хроматид. аберрации Радиозащита (%)
γ
ЭВК+ γ
40
20
20
18
50

Литература
  1. Бурлакова Е.Б., Гаинцева В.Д. -Докл.АН СССР. т.155.N6.ст.1398-1400. 1964.
  2. Бурлакова Е.Б.,Дзюба Н.М.- Синтетические Ингибиторы и природные антиоксиданты. Биофизика. вып.5.N10.ст.766-770.1965.
  3. Шербаков В.К.,Иофа Н.Н.Митотическая активность клеток и рост корешков Allium fistulosum при действии гидрозидов Цитология т.7.N1.ст.100-103.1965.
  4. http://www.worldimage.com/products/info/grapeseedextract.html

Содержание конференции | Секция5