Ц.М.Сумбадзе, *О.В.Северин
Институт экспериментальной морфологии АН Грузии, г. Тбилиси,
* ЗАО “ВНИИМП-ВИТА” (НИИ медицинского приборостроения)РАМН, г. Москва
Создание метода радиоиммунологического анализа яввилось одним из самых значительных достижений в развитии биохимических методов исследования за последние 30 лет. Высокая специфичность, чувствительность, точность и простота этого метода обусловливают его применение не только в клинической практике, но и в фундаментальных исследованиях в области медицины и биологии. В институте экспериментальной морфологии АН Грузии (ИЭМ) РИА - методы микроанализа стали внедряться с конца 70-х годов.
В лаборатории за все годы существования проведено более 1200 тысяч гормональных исследований в области экспериментальной патологии и клинической медицины. Все исследования были выполнены на нескольких поколениях установок для РИА, разработанных и изготовленных НИИ медицинского приборостроения (НИИМП). Эти установки были специально приспособлены НИИМП для проведения острого физиологического эксперимента на подопытных животных (собаки) и позволили проводить с помощью радионуклидных методов не только гормональные исследования, но и комплексное изучение кровообращения. Научным направлением лаборатории является комплексное исследование роли гормонов и других биоактивных веществ при экстремальных состояниях организма. Частью этой работы является изучение регуляторных пептидов APUD- системы - вазоактивного интестинального пептида (VIP) и нейротензина при следующих экстремальных состояниях - висцеральной травме до падения артериального давления на 30-50% от исходного уровня, острой кровопотере в объеме 30% от исходного объема циркулирующей крови (ОЦК) и при иммобилизации животных на операционном столе без нанесения травмы. Эксперимент на собаках продолжался 7 часов. Концентрацию указанных пептидов в плазме крови определяли через каждый час РИА-методом анализа посредством коммерческих наборов фирмы IMMUNO NUCLEAR CORPORATION (США). АД определяли непрерывно тензоманометром, ОЦК - методом изотопного разведения. Исследования кровообращения проводили на установке “Гамма-800” с энергетическим окном, настроенным на работу с йодом-131, а определение гормонов - с помощью установки “Наркотест”. Установки снабжены специализированным программным пакетом НИИМП, созданным для нужд экспериментальной физиологии. В частности, программами ля исследования центального и периферического кровотока радионуклидными методами, и программами для автоматизации выявления зависимостей и проверки гипотез.
При проведении экспериментов по воспроизведению висцеральной травмы оказалось, что не все животные одинаково реагируют на висцеральную травму - одни погибают, а другие выживают. Так были получены 4 группы подопытных животных: висцеральная травма - погибшие, висцеральная травма - выжившие, острая кровопотеря и иммобилизационный стресс. Проведенные исследования выявили, что при висцеральной травме сразу после окончания травматизации уровень VIP заметно повышен в обеих группах - на 140-150% от исходного уровня. В течение дальнейшего развития реактивного синдрома его концентрация в обеих группах продолжает нарастать и к пятому часу наблюдения составляет 210-230% от исходного уровня. Однако к концу эксперимента наблюдается два противоположных течения процесса - в группе выживших после висцеральной травмы животных уровень VIP начинает уменьшаться, приближаясь к исходным величинам, в то время как в группе погибших животных он продолжает катастрофически увеличиваться (до 250% от исходного уровня). Аналогичная картина наблюдается в секреции нейротензина - уже в начале реактивного синдрома наблюдается увеличение его концентрации в крови (до 200% от исходного уровня) в этих группах животных. В дальнейшем его секреция продолжает нарастать и, достигнув максимума (800-1000% от исходного) к 4-5 часам наблюдения начинает медленно снижаться. В группе животных с кровопотерей совершенно иная картина - первые часы наблюдения не выявили существенных изменений концентрацивя VIP и нейротензина в крови. Однако во второй половине эксперимента, когда АД вернулось к норме, а ОЦК выше исходных величин, концентрация обоих пеитидов начинает постепенной возрастать - IP до 140% от исходного уровня, а нейротензин возрастает до 270% от исходного уровня. В группе животных с иммобилизационным стрессом концентрации VIP и нейротензина в крови на протяжении всего времени наблюдения колеблется в пределах исходных величин.
Из вышеизложенного можно заключить, что выявленные большие концентрации VIP и нейротензина в крови при висцеральной травме играют роль вазоконстриктора и наряду с другими биологически активными веществами помогают организму компенсировать тяжелые гемодинамические сдвиги - гиповолемию и гипотензию. Малые же дозы этих пептидов, наблюдаемые при острой кровопотере на поздних стадиях процесса играют роль вазодилятаторов. Таким образом, с помощью радиоиммунохимических методов анализа получены новые данные о роли двух регуляторных пептидов APUD - системы при стрессе и адаптации.