А.С.Кауфман, Д.Х.Ли, О.В.Северин
ЗАО “ВНИИМП-ВИТА” (НИИ медицинского приборостроения)РАМН, г. Москва
В настоящее время считается доказанной связь с инфекцией H.Pylori хронических форм неэрозивного гастрита и дуоденита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, сопровождающихся хроническим гастритом, дуоденитом, а также большинства случаев эпидемического гастрита. Этот микроорганизм широко распространен во всем мире, причем доля носителей H.Pylori в возрастных группах в процентах приблизительно равна возрасту группы. Выявление H.Pylori служит надежным средством диагностики соответствующих заболеваний.
Существует ряд способов определения H.Pylori в обследуемом организме.
Анализу могут подвергаться кровь, тканевые биоптаты из соответствующих отделов желудочно-кишечного тракта и дыхательные газы.
Тесты, основанные на обнаружении в крови пациента специфических антител (как правило методами иммуноферментного анализа), не отличаются высокой надежностью - велика вероятность ложноположительного результата, особенно у леченых лиц, поскольку титр антител остается высоким длительное время после лечения. Кроме того, не обеспечивается адекватный контроль за ходом лечения. Результаты этого теста не позволяют однозначно судить о функциональной активности микроорганизма. Усложнение этого теста, определение одновременно антител, принадлежащих двум классам иммуноглобулинов (IgG и IgM) незначительно повышает надежность и выявляемость рецидивов заболевания, но удорожает анализ.
При проведении диагностической эндоскопии могут быть получены биоптаты, которые можно подвергнуть исследованию для выявления H.Pylori. К методам исследования биоптата относится его гистологический анализ, при котором выявляются соответствующие микробные тела, культуральные исследования, при которых производятся соответствующие посевы и исследуется рост микроорганизмов, производится их классификация и определяется чувствительность к лекарственным препаратам. О наличии H.Pylori в биоптате можно судить по его уреазной активности. Дело в том, что в процессе метаболизма H.Pylori вырабатывает фермент - уреазу, наличие которой в пробе позволяет подтвердить наличие соответствующей инфекции. Для ин-витро определения уреазы созданы недорогие тест системы, содержащие соответствующий индикатор, изменяющий цвет при наличии уреазы в пробе. Однако эти тесты не позволяют судить о функциональной активности H.Pylori ин-виво, могут давать значительное количество ложноотрицательных результатов, связанных с отбором пробы и ее хранением перед анализом. Кроме того, тесты, связанные с отбором и анализом биоптата являются инвазивными.
Наиболее точными являются тесты, основанные на анализе дыхательных газов. Сущность метода заключается в том, что пациенту дают принять таблетку мочевины, меченой радиоактивным изотопом углерода 14С или стабильным изотопом углерода 13С, который содержится в природном углероде в очень малых количествах. Если пациент инфицирован H.Pylori , то под действием уреазы, вырабатываемой микроорганизмом, мочевина будет разложена, а один из продуктов реакции СО2 поступит в кровоток и будет выделяться легкими. Измеряя содержание метки в известном объеме выдыхаемого СО2, отобранного на анализ через 10 минут после приема мочевины, можно судить, как о наличии H.Pylori, так и о его функциональной активности ин-виво.
Очевидно, что для реализации такого метода необходимо наличие соответствующего фармпрепарата - меченой мочевины, средств для отбора определенного количества СО2 из выдыхаемого воздуха и средств для измерения содержания метки в собранной пробе. При использовании в качестве метки 14С для измерения используется жидкостной сцинтилляционный счетчик, а при использовании 13С - масс-спектрометр. Применение 13С сильно удорожает исследование, поскольку и сама метка, и масс-спектрометр очень дороги. Таким образом, исследование с использованием стабильного углерода - удел отдельных лабораторий.
Ряд зарубежных фирм ( ведущая - TRI-MED (США)) начал выпуск диагностических наборов реагентов для реализации данного метода с применением в качестве метки 14С (37 кБк на одну таблетку, что обеспечивает полную безопасность исследования - радиационная нагрузка эквивалентна нагрузке при 1 часе полета на самолете).
В США указанный метод с использованием 14С прошел широкую апробацию в течение ряда лет несколькими специально назначенными группами исследователей и с 9 мая 1997 г. Официально рекомендован FDA для выявления H.Pylori с целью диагностики и мониторинга вышеуказанных заболеваний.
С тем, чтобы облегчить внедрение метода в широкую клиническую практику несколькими приборостроительными фирмами различных стран (США, Швеция) были разработаны упрощенные модели жидкостных сцинтилляционных бета-счетчиков, стоимостью $ 7-15 тыс., т.е. в 5-10 раз дешевле стандартных счетчиков.
В нашей стране имеется сеть лабораторий радионуклидной диагностики и лабораторной клинической иммунологии, укомплектованная значительным количеством (около 300) отечественных бета-счетчиков типа БЕТА-1, БЕТА-2 суммарной производительностью до 50 тыс. Анализов в смену. Эти приборы в большинстве случаев простаивают из-за сокращения объемов исследовательских работ, однако они ИДЕАЛЬНО подходят для выполнения вышеуказанных анализов на H.Pylori. Представляется целесообразным на базе имеющихся лабораторий апробировать указанный высокоинформативный метод диагностики столь распространенных заболеваний, тем более, что упомянутые небезупречные альтернативные методы иммунологической и биопсийной диагностики внедрены в ряде лечебных учреждений страны. Радионуклидные диагностические наборы, необходимые для выполнения анализов, недороги, кроме того имеется отечественная меченая углеродом мочевина, так что возможно организовать выпуск диагностических наборов на одном из существующих радиофармацевтических производств.